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                  Titre : Comptes rendus hebdomadaires des séances de l'Académie des sciences. Série D, Sciences naturelles

                  Éditeur : Gauthier-Villars (Paris)

                  Date d'édition : 1966-1980

                  Type : texte,publication en série imprimée

                  Langue : Français

                  Format : application/pdf

                  Droits : domaine public

                  Identifiant : ark:/12148/cb34383065d/date

                  Identifiant : ISSN 0567655X

                  Source : Archives de l'Académie des sciences

                  Relation : http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb34383065d

                  Description : Variante(s) de titre : Comptes rendus des séances de l'Académie des sciences. Série D, Sciences naturelles

                  Description : Etat de collection : 1966-1980

                  Provenance : bnf.fr

                  Date de mise en ligne : 01/12/2010

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                  Título : Comptes rendus hebdomadaires des séances de l'Académie des sciences. Série D, Sciences naturelles

                  Autor :

                  URL do documento : http://gallica.bnf.fr/ark:/12148/bpt6k5496019d/f717.image


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                  C. R. Acad. Se. Paris, t. 289 (10 décembre 1979) Série D - 1161

                  ENDOCRINOLOGIE. Anatomie immunocytochimique des granules a dans le pancréas
                  endocrine humain [1]. Note (*) de Mariella Ravazzola et Lelio Orci, présentée par Maurice
                  Fontaine.

                  Une nouvelle méthode immunocytochimique utilisant la protéine A marquée à l'or colloïdal a permis de montrer
                  que dans les granules a des cellules A du pancréas humain, les sites antigéniques du glucagon et de la glicentine
                  occupent des régions distinctes du granule : l'immunoréactivité spécifique du glucagon se localise au centre dense du
                  granule, alors que l'immunoréactivité de la glicentine est restreinte au halo périphérique.

                  Using the sensitive protein A-gold technique for the démonstration of antigenic sites in thin section for électron
                  microscopy it was found that in the a granules ofhuman pancréas, glucagon immunoreactivity (spécifie, C-termina!) is
                  restricted to the dense granule core while glicentin immunoreactivity prédominâtes on the peripheral halo surrounding
                  the dense core.

                  INTRODUCTION. Dans un travail précédent [2], nous avons pu montrer par
                  immunocytochimie en microscopie optique et électronique que des sites antigéniques
                  réagissant avec des anticorps dirigés contre la glicentine étaient présents dans les cellules L de
                  l'intestin grêle et dans les cellules A du pancréas et de l'estomac. Les anticorps contre la
                  glicentine, polypeptide de 100 acides aminés isolé et purifié de l'intestin de Porc [3] et
                  contenant la séquence complète du proglucagon de Tager et Steiner ([4], [5], [6]), pouvaient
                  être localisés dans les granules sécrétoires contenant le glucagon, les granules oc, des
                  cellules A pancréatiques et gastriques [2]. Disposant d'une technique d'immunocytochimie
                  avec un plus grand pouvoir de résolution que celle utilisée précédemment [2], nous avons
                  tenté, dans le travail présent, de délimiter des territoires distincts d'immunoréactivité au
                  glucagon et à la glicentine au sein des granules a des cellules A du pancréas humain.

                  MATÉRIEL ET MÉTHODES. Des fragments de pancréas humain prélevés dans la queue de
                  l'organe au cours de biopsies chirurgicales ont été fixés dans de la glutaraldehyde 4 % en
                  tampon phosphate 0,1 M, pH 7,4, deshydratés et inclus en « Épon » 812. Des coupes fines
                  contenant des sections d'îlots de Langerhans ont été collectées sur des grilles porte-objets en
                  nickel puis incubées avec l'antisérum R64 spécifique pour la glicentine et avec
                  l'antisérum 15K spécifique pour l'extrémité C-terminale du glucagon puis les sites de liaison
                  des anticorps révélés par la technique dite de la protéine A-or colloïdal (protein A-gold, pAg)
                  selon Roth et coll. [7]. A la fin de l'incubation, les grilles ont été colorées par l'acétate
                  d'uranyle (1 % en solution aqueuse) et le citrate de plomb 10,5 % en solution aqueuse), puis
                  observées dans un microscope électronique « Philips EM 301 ». Des incubations de contrôle
                  servant à éprouver la spécificité de la réaction immunocytochimique ont été effectuées en
                  incubant des coupes fines avec des antisérums préalablement absorbés avec leurs propres
                  antigènes ou en remplaçant l'incubation avec l'antisérum non absorbé par du tampon
                  phosphate, avant d'appliquer le complexe protéine A-or colloïdal.

                  RÉSULTATS. Dans nos conditions de fixation (glutaraldehyde sans postfixation à
                  l'osmium), l'aspect ultra-structural caractéristique des granules a des cellules A du pancréas
                  humain [8] était bien conservé : les granules a apparaissaient comme des vésicules limitées
                  par une membrane présentant un contenu formé d'une masse centrale arrondie de forte
                  densité électronique entourée d'un halo périphérique de moindre densité. L'incubation des
                  coupes avec l'antisérum antiglucagon provoquait le dépôt de particules d'or colloïdal
                  révélant lui-même les sites de fixation de l'anticorps à l'antigène principalement sur la
                  masse centrale dense des granules a (fig. a). L'incubation des coupes avec l'antisérum
                  antiglicentine induisait le dépôt de particules d'or principalement sur le halo de moindre
                  densité entourant la masse centrale qui était alors dépourvue de marquage ( fig. b). Lorsque


                  Source: gallica.bnf.fr / Archives de l'Académie des sciences

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