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Titre : Comptes rendus hebdomadaires des séances de l'Académie des sciences. Série D, Sciences naturelles
Éditeur : Gauthier-Villars (Paris)
Date d'édition : 1966-1980
Type : texte,publication en série imprimée
Langue : Français
Format : application/pdf
Identifiant : ark:/12148/cb34383065d/date
Identifiant : ISSN 0567655X
Source : Institut de France. Académie des sciences
Relation : http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb34383065d
Description : Variante(s) de titre : Comptes rendus des séances de l'Académie des sciences. Série D, Sciences naturelles
Description : Etat de collection : 1966-1980
Provenance : bnf.fr
Date de mise en ligne : 10/01/2009
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1979/10 (T289,PART2)-1979/12.
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C. R. Acad. Se. Paris, t. 289 (29 octobre 1979) Série D - 737
BIOLOGIE CELLULAIRE. — Culture en monocouches de cellules hépatiques de Souris
adulte sécrétant l'albumine et l'alphafoetoprotéine. Note (*) de Béatrice de Néchaud, Annie
Viron et Edmond Puvion, transmise par René Couteaux.
Des cellules hépatiques de Souris adulte cultivées en monocouches conservent les caractères morphologiques et
ultrastructuraux des hépatocytes et forment des pseudo-canalicules biliaires à partir du 2e jour de culture. Elles
sécrètent — dèslepremierjouretpendant4 semaines — de l'albumine et — à partir du 3e jour et pendant environ
2 semaines — de l'alphafoetoprotéine.
Adult mouse liver cells obtained by enzymatic dispersion were maintained in primary cultures for up to
4 weeks. They retained some ofthe typical morphological and ultrastructural characteristics of hépatocytes. After
2 days of culture, structures similar to bile canaliculi were found and after 6 days clusters ofsmall proliferating cells
were noticed in the gaps ofthe monolayerformed by large well-spread hépatocytes. Almost ail 3-day cultures began to
secrète alphafetoprotein for about 2 weeks, whereas albumin was secreted throughout the period of culture.
INTRODUCTION. — La culture de cellules hépatiques de Rat isolées par perfusion
enzymatique de l'organe ([1] à [4]) est bien documentée ([5], [6], [7]). Il est généralement
admis que ces cultures sont composées d'hépatocytes - les autres cellules hépatiques étant
contresélectionnées par ce mode de préparation — et que ces hépatocytes récupèrent le 2e et
le 3e jour in vitro certaines propriétés biochimiques caractéristiques du foie après avoir réparé
les dommages causés par leur isolement ([5] à [9]). Rien n'avait été publié concernant les
cultures primaires de foie de Souris adulte. Nous présentons ici quelques résultats concernant
de telles cultures, à savoir leur aspect microscopique et ultrastructural et leur capacité à
sécréter continuellement l'albumine et, occasionnellement, l'alphafoetoprotéine.
MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Préparation de cellules isolées. — Nous avons utilisé des Souris
mâles de différentes lignées (C3H, C57BL, Balb/C) âgées de 6 semaines à 4 mois et qui
n'étaient pas à jeun au moment de la perfusion. Les animaux sont endormis à l'éther,
l'abdomen ouvert, la veine porte dégagée et canulée à l'aide d'un dispositif pour
lymphographie (diamètre du cathéter =0,4 mm). On injecte alors par la veine porte un petit
volume d'une solution stérile de Hanks dépourvue de calcium. Dès que le foie blanchit, on
ouvre la cage thoracique et on sectionne la veine cave inférieure. La perfusion se poursuit à la
vitesse de 3 ml/mn. L'injection de 40 ml de Hanks sans Ca + + [3] est suivie de celle de 30 ml
du même milieu additionné de 0,05 % de collagénase et de 0,05 % de hyaluronidase. Le foie
est alors prélevé et, après excision de la vésicule biliaire, coupé menu et agité 3 mn à 37° dans
la solution enzymatique de perfusion. La suspension cellulaire est ensuite filtrée sur gaze
'stérile, lavée deux fois dans du Hanks dépourvu de Ca+ + et une fois dans du milieu minimal
de Eagle additionné de 10 % de sérum de Veau (MEM + SV). Les cellules excluant le bleu
trypan sont dénombrées. Le rendement est de l'ordre de 107 cellules vivantes par foie de
Souris.
Mise en culture des cellules isolées. Recherche des protéines sériques de Souris sécrétées par
les cellules dans les milieux de cultures. — Des flacons ou des boîtes de Pétri sont ensemencés à
une densité cellulaire d'environ 6.104 cellules isolées/cm 2. 4 h'après l'ensemencement, le
milieu (MEM + SV) est renouvelé afin d'éliminer les cellules flottantes. Par la suite, le milieu
est remplacé au bout de 24, 48 ou 72 h. Les milieux usés sont dialyses contre du tampon
P04 (0,001 M, pH 7,4) lyophilisés et la poudre du lyophilisât reprise dans un petit volume
d'eau distillée (facteur de concentration ^25). Les séroprotéines de Souris sont recherchées
dans les milieux de culture ainsi concentrés par immunodiffusion à l'aide d'antisérums
Source: gallica.bnf.fr / Institut de France. Académie des sciences
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